Effect of the Tumor Lysate TRIMEL on Dendritic Cells Migration

Rationale: Phase I and phase II clinical trials performed recently in our laboratory in order to evaluate a new treatment for malignant melanoma patients, and using dendritic cells-based (TAPCells) vaccines loaded with an allogeneic melanoma lysate called TRIMEL, have shown that this therapy is safe, is capable of triggering immune responses in 51% of patients and there is a positive correlation between the development of this response and increased patient survival. The lysate TRIMEL, along with providing a wide range of melanoma-associated antigens, is able to induce a rapid in vitro phenotypic differentiation from monocytes to TAPCells. Despite that, we have not been established yet its effect on migratory capability, a fundamental characteristic of dendritic cells to trigger antitumor immune response. Aim: To evaluate TRIMELxs ability to induce the migration of TAPCells, in order to improve the ex vivo generation of these cells for immunotherapeutic purposes. Methods: To this, in vitro and in vivo experiments were done, using primary cells or cell lines in an ectopic xenograft murine model. Results: Our results showed that: i) TRIMEL increased the expression of the chemokyne receptor CCR7 and also the ability of in vitro cell migration of TAPCells and the monocytic cell line THP-1. We described, for the first time, that TRIMEL increases the in vivo homing of TAPCells from the injection site to regional lymph nodes; ii) TRIMEL induced effects observed in TAPCells can be mediated by the receptors TLR2, TLR4 and RAGE. Conclusion: Taken together these results confirm that TAPCells have the functional capacity to generate anti-tumor responses, supporting our methodology as an efficient tool in the treatment of cancer patients.

Introducción: Ensayos clínicos de fase I y II realizados en nuestro laboratorio para evaluar el tratamiento de melanoma maligno, utilizando vacunas de células dendríticas (TAPCells) cargadas con el lisado de melanoma alogénico denominado TRIMEL, han demostrado que esta terapia es inocua, que es capaz de desencadenar respuestas inmunológicas en el 51% de los pacientes y que existe una correlación positiva entre el desarrollo de esta respuesta y la mayor sobrevida de los pacientes. El lisado TRIMEL, junto con proporcionar una amplia gama de antígenos asociados a melanoma, es capaz de inducir in vitro una rápida diferenciación fenotípica de monocitos a TAPCells, no habiéndose establecido aún su efecto en la migración de estas células, capacidad fundamental para gatillar una respuesta antitumoral. Objetivo: Evaluar la capacidad del lisado TRIMEL de inducir la migración de las TAPCells, con el fin de perfeccionar la generación de estas células ex vivo para su uso en inmunoterapia. Método: Para esto se realizaron ensayos de migración in vitro e in vivo utilizando células primarias o líneas celulares en un modelo murino de xenoinjerto ectópico. Resultados: Nuestros resultados mostraron que: i) El lisado TRIMEL aumenta la expresión del receptor CCR7 y la capacidad de migración in vitro de células TAPCells así como de la línea monocítica THP-1. Asimismo, se describe por primera vez que TRIMEL aumenta el homing in vivo de las TAPCells desde el sitio de inyección a linfonodos regionales; ii) Los efectos inducidos por TRIMEL observados en las TAPCells serían mediados por los receptores TLR2, TLR4 y RAGE. Conclusión: Estos resultados confirman que las TAPCells generadas con el lisado TRIMEL son células que poseen una capacidad funcional de generar respuestas anti-tumorales, siendo una herramienta efectiva en el tratamiento de pacientes con cáncer.