Sjögren’s syndrome: vSNARE-tSNARE proteins in salivary acinar cells

Los pacientes con síndrome de Sjögren (SS) tienen cambios en la polaridad de las células acinares salivales, esto puede comprometer la funcionalidad de la maquinaria secretora Objetivo: Determinamos en este estudio la expresión y localización subcelular de proteínas de fusión v-SNARE/t-SNAREs (Sintaxina-3, Sintaxina-4 y VAMP-8) involucradas en el proceso de exocitosis de los gránulos de secreción. Metodología: Se usaron glándulas salivales labiales (GSL) de 8 pacientes-SS y 8 controles. Los niveles relativos de mRNA y de proteínas fueron determinados con PCR en tiempo real y Western-blot, respectivamente. La localización se evaluó mediante inmunofluorescencia y microscopia confocal. Resultados: La expresión de mRNA y proteínas de Sintaxina 4 y VAMP8 está significativamente disminuida en pacientes-SS, mientras que los niveles proteicos de Sintaxina 3 están aumentados significativamente, lo que se correlaciona con la mayor inmunoreacción en acinos de pacientes. VAMP8 y Sintaxina 3 se localizan normalmente en apical y se redistribuyen hacia basal en pacientes-SS. Sintaxina 4 localiza en la membrana plasmática basolateral en controles y en pacientes-SS se distribuye además en el citoplasma. Conclusión: Las células acinares muestran cambios en la expresión y en la localización subcelular de Sintaxina-3, Sintaxina-4 y VAMP8. Estos hallazgos podrían explicar la hiposecreción que presentan los pacientes-SS. Actualmente nos encontramos evaluando si en condiciones basales se forman complejos SNAREs. FONDECYT 1080006 (MJG, SA, CM).

Salivary acinar cells from Sjögren's syndrome (SS) patients present changes in cell-polarity, which could affect the functionality of its secretory machinery. Objective: We detected the expression and sub-cellular location of v-SNARE/t-SNARE proteins (Sintaxin-3, Sintaxin-4 and VAMP-8) involved in the membrane fusion during the exocytosis. Methodology: Labial salivary glands (LSG) from 8 SS-patients and 8 control subjects were used. The mRNA and protein relative levels were determined with real-time PCR and Western-Blot, respectively. The sub-cellular location was evaluated with immunofluorescence and confocal microscopy. Results: The mRNA and protein expression of Sintaxin-4 and VAMP-8 was significantly diminished in SS-patients, while the Sintaxin-3 protein levels were significantly augmented; this is related with the strong immunoreaction observed in acini from SS-patients. VAMP-8 and Sintaxin-3 were located in apical in control samples, while were re-distributed to basal in SS-patients. Sintaxin-4 is located at basolateral plasma membrane in controls and is also distributed to cytoplasm in SS-patients. Conclusion. The salivary acinar cells show relevant changes in the expression and sub-cellular location of Sintaxin-3, Sintaxin-4 and VAMP-8. These findings could explain the hyposecretion suffered by SS-patients. Now, we are evaluating if under basal conditions, SNARE proteins form complexes. FONDECYT 1080006 (MJG, SA, CM).