Objetivos: El almidón se considera no cariogénico para esmalte y moderadamente cariogénico para dentina, pero la cariogenicidad de ambos azúcares combinados no está clara. El propósito de este estudio fue evaluar el efecto de la combinación de éstos azúcares sobre las propiedades de biofilms de Streptococcus mutans y sobre la desmineralización de esmalte y dentina. Métodos: Biofilms de S. mutans UA159 fueron cultivados sobre bloques de esmalte y dentina bovinos en presencia de saliva. Los bloques sometidos a los siguientes tratamientos: 1) NaCl 0.9%, 2) almidón-1%, 3) sacarosa-10% y 4) almidón-1%+sacarosa-10%. Cada bloque con biofilm fue tratado 8/día, 4 días para dentina y 5 para esmalte, en triplicado y en tres experimentos independientes (n=9). El pH del medio fue medido 2/día (acidogenicidad). Los biofilms fueron recolectados para analizar: microorganismos viables, polisacáridos intracelulares (PIC), polisacáridos extracelulares solubles (PECS) e insolubles (PECI). El peso húmedo y seco del biofilm (biomasa) se utilizó para normalizar los datos. El porcentaje de pérdida de dureza superficial (%PDS) en relación a los valores basales fue determinado sobre los bloques (desmineralización). Los resultados fueron comparados usando ANOVA y Tukey (p<0.05). Resultados: Biofilms expuestos a almidón+sacarosa fueron más acidogénicos que los que crecieron en presencia de cada azúcar por separado, en esmalte o dentina (p<0.05). El %PDS más alto se observó en el tratamiento de almidón+sacarosa (p <0.05), en los dos sustratos. No se encontraron diferencias en microorganismos viables, PECS y PIC, para esmalte o dentina. En dentina, los biofilms expuestos a los dos azúcares juntos produjeron más PECI que cualquier otro grupo y más que los grupos 1 y 2 en esmalte (p<0.05). La biomasa de los biofilms con almidón+sacarosa fueron mayores que los otros tratamientos (p<0.05), para ambos sustratos. Conclusión: La combinación almidón-sacarosa es más cariogénica que los azúcares por separado, en esmalte o dentina.